| 大片段DNA的测序 |
| ■ 鸟枪法 (Shot Gun Sequencing) 测序 |
| ◇ 鸟枪法测序的操作方法 |
| 1. 对欲测序的DNA用物理方法进行切断处理，然后对片段DNA进行末端平滑化及磷酸化处理。 2. 进行Agarose电泳，切胶回收适当长度的片段DNA。 3. 将回收的DNA片段连入平端载体中，然后转化，挑选克隆。 4. 挑选一定数量的阳性克隆进行DNA测序。 5. 对数据进行编辑，最后拼接成一条大片段的DNA序列。 |
| ◇ DNA测序量 |
应该进行的DNA测序量以DNA片段实际长度的5倍量进行计算，对每个反应的有效测序长度定义为650 Bases。如：对10 kb的DNA片段进行测序时，可以按以下方法进行计算： |
| ◇ 结果编辑 |
| 按上述所示计算的反应数量进行DNA测序，然后对其所有结果进行编辑。此时的测序结果会拼接成数个DNA大片段 (Contig)。 |
| ◇ 补缺工作 |
| 结果编辑工作结束后，会发现在数个DNA大片段 (Contig) 间的序列没有测定，此时应该进一步通过技术手段，解析那些没有被解明的DNA序列，进行整体DNA序列的补缺工作。 |
| ◇ 收费标准 |
| 来样前请询价。 |
| ◇ 其他说明 |
| 1. 病毒DNA中，特别是病毒DNA的两端经常会有大片段的 DNA重复序列出现，可能无法测序，请理解。 2. DNA序列中，有时会有G、A、C、T的连续结构、G/C rich等复杂的立体结构出现，此部分有可能无法测序，请理解。 |
页面更新：2015-05-27 16:07:27
京公网安备 110114000405号