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Retrovirus Titer Set (for Real Time PCR)
品牌 Code No. 包装量 价格 说明书 数量
Takara 6166 100 次 991 元
 
■ 制品内容 (100 次量)*1
Forward Titer Primer FRT-1(10 pmol/ μl) 50 μl
Reverse Titer primer RRT-1(10 pmol/ μl) 50 μl
RNA Control Template (5×108 copies/ μl)*2 10 μl
EASY Dilution (for Real Time PCR) 1 ml×2
DNase I (RNase Free) (5 U/μl) 40 μl
10×DNase I Buffer 50 μl
RNase Inhibitor (40 U/μl) 10 μl
 
*1 Real Time RT-PCR 100次反应,DNase I 可以处理 20次。
*2 为了避免RNA Control Template反复冻融降解,请分成小包装-70℃~-80℃保存使用。
 
■ 制品说明
Retrovirus Titer Set (for Real Time PCR) 是利用Real Time RT-PCR法测定基于MLV (murine leukemia virus: 小鼠白血病病毒) 改造的逆转录病毒载体的基因组RNA量,确定逆转录病毒滴定度的制品。本制品与One Step TB Green PrimeScript RT-PCR Kit* (Perfect Real Time)(Code No. :RR066A/RR086A)一起使用,4小时内即能直接测定病毒上清液中RNA的滴定度。另外,本制品扩增的是MLV病毒包装信号的序列区,可以测定几乎所有的以MLV为基础改造的逆转录病毒载体的RNA滴定度。
逆转录病毒载体感染效率测定时,目的细胞被逆转录病毒载体感染后,通常是利用荧光和抗药性等测定感染效率,然后算出滴定度。这个方法需要数日,而且,如果没有报告基因和抗药性基因,使用此方法不能进行测定。另外,根据生物学滴定度决定感染复数 (MOI) 进行细胞感染时,滴定度测定需要数日,因此病毒上清液需要冷冻保存,冻融容易使病毒滴定度降低,并造成感染复数 (MOI) 不准,同时易造成污染。
本制品是对逆转录病毒载体的基因组RNA量进行测定,对没有报告基因和抗药性基因的逆转录病毒载体也能够测定滴定度。由于在4小时内即可得到测定结果,因此病毒上清液不需要冷冻保存,并可以根据测定的感染复数 (MOI) 进行感染。
配套使用的One Step TB Green PrimeScript RT-PCR Kit (Perfect Real Time) 是采用嵌合荧光染料法进行One Step RT-PCR反应的专用试剂。本制品中使用了适合于Real Time RT-PCR的反转录酶PrimeScript RTase (RTase H free) 和TaKaRa Ex Taq HS,具有高扩增效率和高扩增特异性,能进行稳定的Real Time One Step RT-PCR反应。
 
■ 保存
RNA Control Template: -80℃
其他组份:-20℃
 
 

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