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机构用户解决方案

AAVpro® Helper Free System
品牌 Code No. 包装量 价格 说明书 数量
Takara 6673 1 Kit 7,932 元
Takara 6230 1 Kit 7,932 元
Takara 6650 1 Kit 7,932 元
Takara 6651 1 Kit 7,932 元
Takara 6672 1 mg each 7,932 元
Takara 6234 1 mg each 7,932 元
Takara 6664 1 mg each 7,932 元
Takara 6665 1 mg each 7,932 元
 
■ 制品说明
腺相关病毒 (AAV) 是DependovirusParvovirus家族的无包膜病毒。AAV对人无致病性,只有在辅助病毒如腺病毒或疱疹病毒存在下才能复制。AAV基因组是约4.7 kb的单链线状DNA分子,在每个末端都有发夹结构的反向末端重复序列 (ITRs) ,ITRs的功能在于基因组复制起始位点及包装病毒粒子。AAV基因组包含了3个开放阅读框 (图1) :Rep编码参与复制和转录的蛋白质;Cap编码病毒衣壳蛋白质;AAP编码用于病毒粒子形成的非结构蛋白质。Rep区域编码4种不同的蛋白质 (Rep78, Rep68, Rep52和Rep40) ,Cap区域编码3种不同的蛋白质 (VP1, VP2和VP3) 。
AAV有100多种血清型,不同血清型病毒间的宿主特异性和特点有所不同。Takara Bio Inc.提供AAV 1型 (AAV1) 、2型 (AAV2) 、5型 (AAV5) 、6型 (AAV6) 的制备试剂盒。2型 (AAV2) 具有广泛的研究应用,包括基因治疗,也具备泛嗜性特点。而AAV1、AAV5和AAV6却受限于组织宿主。AAV1对于肌肉、肝脏、呼吸道和中枢神经系统有高转导效率;AAV5对于中枢神经系统、肝脏和视网膜有高转导效率;AAV6对于心肌细胞、肌肉和肝脏有高转导效率。
腺相关病毒载体 (AAV载体) 能够转导基因进入细胞和生物体,可用作研究工具和基因治疗的载体。另外,AAV载体较腺病毒载体和逆转录病毒载体更安全。AAV载体能用于转导基因进入增殖和非增殖细胞,以及在未分裂细胞内的长期表达,AAV很少有免疫原性,非常适用于转导基因进入动物体内 (作为体内转导工具) 。
 
■ 制品特点
使用AAV Helper Free System制备AAV病毒
AAV Helper Free System是一种特别的可制备高滴度AAV的无辅助病毒系统 (图2) 。6230试剂盒包含3种质粒,只需将制备AAV病毒所需的这3种载体质粒转染于HEK293细胞中,即可制备AAV病毒。
·pRC2-mi342 Vector:包含AAV2的Rep基因和Cap基因
 *pRC2-mi342可表达hsa-miR-342,hsa-miR-342是一种病毒制备系统中可提高病毒滴度的人源miRNA。与一般 只表达Rep基因和Cap基因的pRC2 Vector相比,病毒滴度可提高2倍。
·pHelper Vector:包含腺病毒的E2A、E4和VA基因的载体质粒。
·pAAV-CMV Vector:包含目的基因表达启动子和2个ITR的载体质粒。质粒包含目的基因克隆(GOI)位点,GOI 由CMV启动子表达。由于AAV病毒中能够包装的插入DNA大小有限,使用试剂盒中pAAV-CMV Vector时,插入的DNA片段大小应在2.5 kb以下。
 
图2.使用AAVpro Helper Free System 制备AAV病毒
 
■ 制品内容
AAVpro® Helper Free System (AAV1) (Code No. 6673)
pAAV-CMV Vector (1 μg/μl) 20 μl
pRC1 Vector (1 μg/μl) 20 μl
pHelper Vector (1 μg/μl) 20 μl
AAV Extraction Solution A 1.5 ml×3
AAV Extraction Solution B 150 μl×3
   
Limited Use Label License: [L68], [M84]
 
AAVpro® Helper Free System (AAV2)(Code No. 6230)
pAAV-CMV Vector (1 μg/μl) 20 μl
pRC2-mi342 Vector (1 μg/μl) 20 μl
pHelper Vector (1 μg/μl) 20 μl
AAV Extraction Solution A 1.5 ml×3
AAV Extraction Solution B 150 μl×3
   
Limited Use Label License: [M83], [M84]
 
AAVpro® Helper Free System (AAV5) (Code No. 6650)
pAAV-CMV Vector (1 μg/μl) 20 μl
pRC5 Vector (1 μg/μl) 20 μl
pHelper Vector (1 μg/μl) 20 μl
AAV Extraction Solution A 1.5 ml×3
AAV Extraction Solution B 150 μl×3
   
Limited Use Label License: [M84]
 
AAVpro® Helper Free System (AAV6) (Code No. 6651)
pAAV-CMV Vector (1 μg/μl) 20 μl
pRC6 Vector (1 μg/μl) 20 μl
pHelper Vector (1 μg/μl) 20 μl
AAV Extraction Solution A 1.5 ml×3
AAV Extraction Solution B 150 μl×3
   
Limited Use Label License: [M84]
 
AAVpro® Packaging Plasmid (AAV1) (Code No. 6672)
pRC1 Vector (1 μg/μl) 0.5 ml×2
pHelper Vector (1 μg/μl) 0.5 ml×2
   
Limited Use Label License: [L68]
 
AAVpro® Packaging Plasmid (AAV2) (Code No. 6234)
pRC2-mi342 Vector (1 μg/μl) 0.5 ml×2
pHelper Vector (1 μg/μl) 0.5 ml×2
   
Limited Use Label License: [M83]
 
AAVpro® Packaging Plasmid (AAV5) (Code No. 6664)
pRC5 Vector (1 μg/μl) 0.5 ml×2
pHelper Vector (1 μg/μl) 0.5 ml×2
   
 
AAVpro® Packaging Plasmid (AAV6) (Code No. 6665)
pRC6 Vector (1 μg/μl) 0.5 ml×2
pHelper Vector (1 μg/μl) 0.5 ml×2
   
 
■ 各载体序列
zip压缩形式,点击查看:
· pAAV-LacZ(fasta data)
· pHelper(fasta data)
· pRC1(fasta data)
· pRC5(fasta data)
· pRC6(fasta data)
· pRC2-mi342(fasta data
 
■ 保存
-20℃。
AAV Extraction Solution A 和AAV Extraction Solution B融解后,请于室温保存。
 
 

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