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| ■ 制品说明 |
· 测定培养上清液中的慢病毒滴度
· 简便的ELISA法、HRP-显色试剂测定
· Single Wash版本只需一次洗涤步骤，可更快获得检测结果（1.5小时） |
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| 慢病毒p24蛋白 |
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| 目前第三代或第四代重组慢病毒已被广泛用于研究用途，它们都保留了编码病毒衣壳蛋白（p24）、核衣壳蛋白（p6和p7）和基质蛋白（p17）的gag基因。Lenti-X p24 Rapid Titer Kit可以特异性测定病毒上清液中的p24衣壳蛋白含量，p24蛋白含量（图1）与慢病毒滴度直接相关。 |
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| 图1. 慢病毒粒子 |
| p24蛋白是HIV-1 gag基因编码的四种蛋白的其中一种，存在于慢病毒衣壳中。包装细胞上清液中的p24的含量可被用于测定慢病毒滴度。 |
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| 使用方法 |
用裂解缓冲液裂解培养上清中的重组慢病毒释放p24蛋白，制备含有p24蛋白的样品。将样品添加至96孔板（可分割的8连孔×12、已预包被抗HIV-1 p24捕获抗体）的样品孔中，使p24蛋白与抗体相结合。
洗涤移除未结合的样品，使用生物素标记的二抗、辣根过氧化物酶标记链霉亲和素及显色剂测定特异结合的p24蛋白（图2）。本试剂盒提供p24蛋白作为阳性对照，用于制定标准曲线、测定样品中的病毒含量。
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| Lenti-X p24 Rapid Titer Kit (Single Wash)与Lenti-X p24 Rapid Titer Kit比较 |
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Lenti-X p24 Rapid Titer Kit (Single Wash) |
Lenti-X p24 Rapid Titer Kit |
| 二抗 |
HRP标记 |
生物素标记 |
| 操作时间 |
1.5 小时 |
3小时 |
| 所有操作步骤 |
4步 |
8步 |
| 洗涤次数 |
1次 |
3次 |
| P24测定范围 |
100～1,600 pg/ml |
12.5～200 pg/ml |
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| 图2．两款试剂盒操作流程比较 |
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| 图3. Lenti-X p24 Rapid Titer Kit (Single Wash)操作流程 |
| 制备含有培养上清液、裂解缓冲液、HRP标记二抗的混合样品，将混合样品添加至预包被了抗p24小鼠一抗的检测孔中并孵育。洗涤后，加入显色试剂检测p24蛋白。 |
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| 图4. Lenti-X p24 Rapid Titer Kit操作流程 |
| 将培养上清液和裂解缓冲液添加至预包被抗p24小鼠一抗的检测孔中并孵育。洗涤后，顺序加入生物素标记的二抗、链霉亲和素标记的HRP反应后，加入显色试剂检测p24蛋白。 |
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| 图5. Lenti-X p24 Rapid Titer Kit (Single Wash) 标准曲线 |
| 按照用户手册指导制备p24标准品稀释液并进行测定。上述左侧表格显示了p24标准品稀释液的测定结果，右侧标准曲线图由表中的数值生成。 |
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| ■ 制品内容 |
Lenti-X p24 Rapid Titer Kit (Single Wash)（Code No. 631476）
· Anti-p24 Coated Plate (12×8-well microtiter strips) 1 plate
· p24 Control 500 ng
· p24 Reconstitution Buffer 1.5 ml
· Diluent Buffer 20 ml
· Lysis Buffer 4 ml
· Anti-p24 (HRP Conjugate) 12 ml
· Washing Buffer (20X) 50 ml
· TMB Substrate 12 ml
· Stop Solution 12 ml |
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Lenti-X p24 Rapid Titer Kit（Code No. 632200）
· Anti-p24 Coated Plate (96 wells×1)
· p24 Control (10 ng/ml) 100 μl
· Lysis Buffer 6 ml
· Anti-p24 (Biotin Conjugate) 12 ml
· Streptavidin HRP 12 ml
· Washing Buffer (20X) 120 ml
· TMB Substrate 12 ml
· Stop Solution 12 ml |
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| ■ 保存 |
Code No. 631476 4℃（Washing Buffer (20X)开封后室温保存）
Code No. 632200 4℃
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慢病毒p24滴度测定试剂盒(Single Wash)
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京公网安备 110114000405号