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CellAmp Direct SYBR® RT-qPCR Kit
品牌 Code No. 包装量 价格 说明书 数量
Takara 3735A 1 Kit 8,000 元
Takara 3735S 1 Kit 2,300 元
 
 
 
■ 制品内容 (200 次量)*
CellAmp Washing Buffer*1 2.5 ml × 5
CellAmp Lysis Buffer II*1 1 ml × 5
DNase I for Direct RNA Prep*1 200 μl
Stop Solution*1 250 μl
PrimeScript RT Enzyme Mix*2 200 μl
5×CellAmp Buffer II*2 400 μl
RT Primer Mix*2、3 100 μl
RNase Free H2O*2 1 ml × 2
SYBR Fast qPCR Mix (2×)*4、5 625 μl × 10
ROX Reference Dye (50×)*4、5、6 250 μl
ROX Reference Dye II (50×)*4、5、6 250 μl
*1 Cell Lysis用试剂,100 次量。
*2 RT(反转录)试剂,100 次量。
*3 包含Oligo dT Primer和Random 6 mers。
*4 qPCR试剂,500 次量。
*5 与SYBR Fast qPCR Mix(Code No. RR430S/A/B)相同,使用不够时请另行购买。
*6 Thermo Fisher Scientific公司的Real Time PCR仪器等,用于使用需要进行孔间荧光信号校正的仪器解析时。
◆ 需要添加ROX Reference Dye(50×)的仪器
Applied Biosystems 7300 Real-Time PCR System
StepOnePlus Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific)
◆ 需要添加ROX Reference Dye II(50×)的仪器
Applied Biosystems 7500/7500 Fast Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific)
◆ 不需要添加的仪器
Thermal Cycler Dice Real Time System III(Code No. TP950/TP970/TP980/TP990)
Thermal Cycler Dice Real Time System II(Code No. TP900/TP960)
Thermal Cycler Dice Real Time System Lite(Code No. TP700/TP760)
LightCycler 96/LightCycler 480 System(Roche Diagnostics)
CFX96 Real-Time PCR Detection System(Bio-Rad)
Smart Cycler System/Smart Cycler II System(Cepheid)
 
Limited Use Label License:[M40], [M82], [L11]
 
■ 制品说明
CellAmp Direct SYBR RT-qPCR Kit是无需对96孔板或者其他板上培养的各种动物细胞进行RNA提取(cell line化的贴壁细胞和悬浮细胞、原代培养细胞、各种干细胞、iPS细胞等),只需简单的操作就可以进行Real Time RT-PCR的试剂盒。使用该试剂盒,从培养细胞起始,最短仅需1.5小时便可以完成从模板制备到反转录反应及基因表达分析等操作。此外,能够有效去除基因组DNA,对于有基因组DNA混入而出现问题的解析(设计Primer不跨内含子,基因表达量低样品)也可以很好的发挥作用。SYBR Green I 检测用的两步法Real Time RT-PCR试剂也包含在此试剂盒中,无需另行准备,即可轻松地进行基因表达分析。
* 试剂盒中的qPCR试剂与SYBR Fast qPCR Mix (Code No. RR430S/A/B)相同,使用不够时请另行购买。
 
■ 保存
-20℃。
CellAmp Washing Buffer 和 CellAmp Lysis Buffer II
  溶解后置于4℃保存,注意防止污染。
SYBR Fast qPCR Mix(2×)
  4℃可稳定保存6个月。避光保存,避免污染。
  长期保存时请于-20℃保存。SYBR Fast qPCR Mix(2×)溶解后可4℃保存,于6个月内使用完。
  使用时要完全溶解且颠倒混匀。
 
■ 使用注意
以下为使用本试剂盒时的注意事项,使用前一定认真阅读。
1. 细胞裂解液的制备要迅速,不要停滞。
2. 分装试剂时要使用一次性枪头避免样品之间的污染。
3. RNA操作时的注意事项
· 市售的灭菌一次性Tube通常认为是RNase free的产品,可直接用于实验,Microtube和微量移液器使用的枪头需要灭菌处理后再使用。
· 玻璃器具、匙等使用前需要160℃干热灭菌至少2小时以上。对于无法干热灭菌的耗材,使用0.1%的DEPC水在37℃处理12小时,然后高压灭菌。用于RNA实验的器具请与其他类实验用的器具分开存放。
· 样品制备的过程中还需要其他防污染措施,包括使用无菌一次性手套以及口罩等防止汗液及唾液造成的污染。
 
 

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