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Deletion Kit for Kilo-Sequencing
品牌 Code No. 包装量 价格 说明书 数量
Takara 6030 5 次 1,200 元
 
■ 制品内容 (5 次量)
Exonuclease Ⅲ (180 units/μl) 10 μl
Exo Ⅲ buffer 500 μl
Mung Bean nuclease (25 units/μl) 20 μl
Mung Bean nuclease buffer 500 μl
Klenow fragment (2 units/μl) 10 μl
Klenow buffer 250 μl
Ligation solution A 500 μl
Ligation solution B 60 μl
 
■ 制品说明
本制品是对M13mp系列噬菌体载体 (mp18、19) 和pUC系列质粒载体 (pUC18、19和pUC118、119) 多克隆位点中插入的数千个碱基片段进行测序的试剂盒。
同时本制品也可有效用于DNA片段末端的单向缺失。
本制品是Steven Henikoff法 (Gene (1984)28、351~359) 和Celeste Yanision-Perron法(Gene(1985)33、103~119)的改良品。
 
保存
-20℃。
 
■ 长链DNA测序原理
本制品是利用Exonuclease 的3’→5’外切酶活性制作连续的单向缺失DNA片段的试剂盒。Exonuclease 从5’突出末端或平滑末端的3’端连续降解核苷酸,但对于3’突出末端的降解活性较低。基本上,插入的目的DNA是被连续消化的,但测序引物的退火结合位点通过连接4碱基的3’突出的限制酶切位点而避免被消化。分取不同时间间隔的Exonuclease 反应液,用Mung Bean nuclease/buffer cocktail处理,终止Exonuclease 反应并同时切断互补链的5’突出末端。使用Klenow Fragment进行平滑化后,使用Ligation cocktail进行连接环化,转化到感受态细胞中。
 
 

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